提高
生物樣品掃描電鏡圖像質量的技巧
一、樣品制備
1、清潔樣品：確保樣品表面無油污、灰塵或污染物?？梢允褂脷怏w吹掃、超聲波清洗或化學清洗等方法。
2、固定與脫水：使用化學試劑如戊二醛或甲醛固定生物樣品，以保持其結構完整。然后通過梯度脫水處理，通常使用乙醇或丙酮。
3、干燥處理：選擇適當的干燥方法，如冷凍干燥或臨界點干燥，以避免樣品結構的破壞。
4、導電涂層：對于非導電樣品，施加導電涂層（如金、鉑或碳涂層）以防止電荷積累，提高圖像的穩定性和對比度。
二、設備設置與操作
1、選擇合適的加速電壓：根據樣品的導電性和觀測目的選擇合適的加速電壓。較低的加速電壓適合觀察樣品表面細節。
2、調整電子束強度：適當降低電子束強度以減少樣品損傷，避免過度照射引起的圖像失真。
3、優化工作距離：較短的工作距離通?？梢垣@得更高的分辨率，但需要根據樣品的幾何形狀進行調整。
4、消除像散：在高倍率成像時，確保消除像散以避免圖像變形。
三、圖像采集與處理
1、聚焦與合軸：在低倍率下進行粗調和精調聚焦，然后逐步提高放大倍數并進行進一步的調整。
2、選擇合適的檢測模式：根據分析目的選擇合適的檢測模式，如二次電子成像（SEI）用于觀察表面形貌。
3、圖像后處理：使用圖像處理軟件進行對比度增強、噪聲降低和銳化處理，以改善圖像質量。
4、圖像標注與記錄：在圖像上標注必要的參數信息，如放大倍數、工作距離、探測器類型等。
通過以上技巧，可以顯著提高生物樣品掃描電鏡的圖像質量，使其更清晰、更準確地反映樣品的微觀結構和特征。
